序言：作為思想的載體和知識(shí)的探索者，寫作是一種獨(dú)特的藝術(shù)，我們?yōu)槟鷾?zhǔn)備了不同風(fēng)格的5篇養(yǎng)生保健方法，期待它們能激發(fā)您的靈感。

篇1

健康是人生的第一財(cái)富，健康長壽是人類追求的生活目標(biāo)，而值得重視的是目前我國高血壓患者達(dá)1.6億,糖尿病患者達(dá)4000萬人,血脂異常者1.6億,超重及肥胖人群達(dá)2億多人,這是導(dǎo)致心腦血管病高發(fā)的主要原因。一個(gè)人能否健康長壽，其中不可控因素遺傳基因約占25%，社會(huì)和環(huán)境因素及醫(yī)療條件占15%，而可控因素不良生活方式等占60%。所以，許多人不是死亡于疾病，而是死亡于不健康的生活方式。健康的鑰匙掌握在每個(gè)人自己手中，要求我們要做到合理膳食、適當(dāng)運(yùn)動(dòng)、戒煙限酒、心理平衡、科學(xué)養(yǎng)生。從而提高人們的生命質(zhì)量，達(dá)到延長生命、健康長壽的目的。

一、順應(yīng)自然，合理膳食

每個(gè)人的飲食習(xí)慣不同，要順其自然，粗細(xì)葷素都要吃，提倡每日飲食種類多樣化，營養(yǎng)要全面、均衡。限制食鹽攝入量，增加蔬菜、水果、乳制品、豆制品。每天吃較多水果和蔬菜的人心腦血管病相對(duì)危險(xiǎn)度減低，而脂肪和膽固醇的過多攝入可加速動(dòng)脈硬化，易導(dǎo)致心腦血管病的發(fā)生。食鹽量過多可使血壓升高并促進(jìn)動(dòng)脈硬化形成。《黃帝內(nèi)經(jīng)》里講：“五谷為養(yǎng)，五果為助，五畜為益，五菜為充。”五谷指五谷雜糧是養(yǎng)命的，五果指水果是幫助消化的，五畜指肉類是起補(bǔ)益作用的，五菜指的是各式各樣的蔬菜是起補(bǔ)充作用的。這是我們祖先總結(jié)的飲食結(jié)構(gòu)經(jīng)驗(yàn)。每個(gè)人可根據(jù)自己不同的體質(zhì)來調(diào)節(jié)。隨著年齡的增大過了中年以后，在飲食結(jié)構(gòu)上更要注意，是好吃八分飽。

二、適當(dāng)運(yùn)動(dòng)，動(dòng)靜結(jié)合，控制體重

適當(dāng)?shù)捏w育活動(dòng)可以改善心臟功能，增加腦血流量，改善微循環(huán)，可降低升高的血壓，控制血糖水平、血脂和降低體重，從而起到防治心腦血管病的作用。建議每周至少進(jìn)行3-4次的有氧運(yùn)動(dòng)，每次活動(dòng)時(shí)間不少于30分鐘，根據(jù)每人具體情況來選擇如快走、慢跑、太極拳、游泳、健身操等有氧運(yùn)動(dòng)，運(yùn)動(dòng)時(shí)間最好在上午太陽出來后或下午為好，因?yàn)榍宄繒r(shí)段是心血管疾病的高發(fā)時(shí)段，中老年人尤其是心血管疾病患者更要慎重對(duì)待晨練。運(yùn)動(dòng)固然重要，不過一旦出現(xiàn)下述情況，如出現(xiàn)嚴(yán)重呼吸費(fèi)力，前胸壓迫感，有明顯心慌、頭昏眼花、面色蒼白等現(xiàn)象，應(yīng)立即停止運(yùn)動(dòng)，必要時(shí)應(yīng)盡快就醫(yī)。理想體重約為身高（厘米）減去105，體重波動(dòng)范圍在理想體重的正負(fù)10%以內(nèi)。

生命在于運(yùn)動(dòng)，長壽在于寧靜，寧靜是指心平氣和、內(nèi)心寧靜，保持體內(nèi)環(huán)境的協(xié)調(diào)平衡。通過寧靜降低人體生命活動(dòng)能量消耗，使生命進(jìn)入一個(gè)最佳的運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)，動(dòng)靜結(jié)合，從而達(dá)到延長生命，健康長壽。

三、戒煙限酒，注意飲酒與藥物作用反應(yīng)

吸煙是心腦血管病危險(xiǎn)因素。吸煙可損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，引起血管痙攣，加速動(dòng)脈硬化，促使血小板聚集，促進(jìn)血栓形成及心律失常等。因此，要鼓勵(lì)吸煙都戒煙。長期大量酗酒導(dǎo)致心腦血管病發(fā)病率增加，包括升高血壓，導(dǎo)致高凝狀態(tài)，心律失常，降低腦血流量等。所以建議飲酒都一定要適度，每日飲白酒不超過50毫升（即一兩，乙醇含量小于30克），啤酒不超過640毫升，葡萄酒不超過200毫升，女性減半。

這里需要提醒大家：在注射或口服頭孢類抗生素，降壓降糖類藥，治療心血管的硝酸酯類藥（如硝酸甘油、消心痛、欣康等），甲硝坐、氯霉素、痢特靈等藥物期間應(yīng)禁止飲酒。避免由酒精影響肝臟對(duì)藥物的代謝，從而防止出現(xiàn)惡心嘔吐，心率加快，面部潮紅，甚至發(fā)生過敏性休克等危及生命的不良反應(yīng)。

四、心理平衡，保持良好的心態(tài)

自覺保持永遠(yuǎn)快樂的心境，是一門健康的科學(xué)，又是一門生活藝術(shù)。世衛(wèi)組織對(duì)心理健康提出的建議是：“了解自已，悅納自己；接受他人，善待他人；正視現(xiàn)實(shí)，接受現(xiàn)實(shí)；熱愛生活，樂于生活。”喜怒憂思悲恐驚是每個(gè)人都有的，但是一定要記住不可過度，過度就會(huì)傷害身體。一個(gè)人的心態(tài)一旦失去平衡，勢(shì)必引發(fā)神經(jīng)體液系統(tǒng)功能發(fā)生紊亂，免疫功能下降，從而為疾病的發(fā)生帶來可乘之機(jī)，甚至引起猝死。做好心理平衡，保持良好的心態(tài)是健康長壽最重要的一條。

五、介紹幾種保健養(yǎng)生按摩供大家參考

（一）熨目擦面：兩手搓熱熨摩雙目，可做三五次，然后兩拇指根從眼角經(jīng)鬢角發(fā)際輕輕推至耳后，順手搓雙耳三五次。擦面：雙手從下向上貼面擦搓，至發(fā)際時(shí)，十指彎曲，經(jīng)頭頂梳至后腦，再變掌擦頸，回到下頦，如此三五次，可煥發(fā)精神，頭目清明感。

（二）按摩手：先雙手稍用力搓熱手掌，然后用右手掌心搓左手背至熱，左手掌心搓右手背至熱。按揉指節(jié)：用右手拇、食二指按揉左手各指節(jié)，按拇指、食指、中指、無名指和小指的順序，從前后和內(nèi)外側(cè)分別按揉各指節(jié)18-36次，然后換手進(jìn)行。拍擊雙掌：取站或坐式，雙手在胸前合掌，然后雙手掌心在腹前拍擊若干下，之后再合掌。

（三）腹部按摩：科學(xué)摩腹，增強(qiáng)胃腸之功能，回陽固精，從而社病強(qiáng)身。摩腹宜在臨睡前及晨起時(shí)進(jìn)行，先排空大小便，站立或仰臥均可，須精神集中，意守丹田（位于肚臍下4橫指處）。將左手放在右手背上，以胃胱部為中心，作順時(shí)針方向由內(nèi)向外揉摩全腹100次，逆時(shí)針方向100次。而后用手指在氣海穴（臍下2橫指處），關(guān)元穴（臍下4橫指處）按摩99次。

篇2

1、初春陽氣漸生，氣候也日趨暖和，人們逐漸去棉穿單。但此時(shí)北方陰寒未盡，氣溫變化大，雖然雨水之季不像寒冬臘月那樣冷冽，但由于人體皮膚腠理已變得相對(duì)疏松，對(duì)風(fēng)寒之邪的抵抗力會(huì)有所減弱，因而易感邪而致病。所以此時(shí)注意“春捂”是有一定道理的。

2、雨水這種變化無常的天氣，容易引起人的情緒波動(dòng)，乃至心神不安，影響人的身心健康，對(duì)高血壓、心臟病、哮喘患者更是不利。

3、為了消除這些不利的因素，除了應(yīng)當(dāng)繼續(xù)進(jìn)行春捂外，應(yīng)采取積極的精神調(diào)攝養(yǎng)生鍛煉法。保持情緒穩(wěn)定對(duì)身心健康有著十分重要的作用。

4、雨水后，春風(fēng)送暖，致病的細(xì)菌、病毒易隨風(fēng)傳播，故春季傳染病常易暴發(fā)流行感冒。每個(gè)人應(yīng)該保護(hù)好自己，注意鍛煉身體，增強(qiáng)抵抗力，預(yù)防疾病的發(fā)生。

（來源：文章屋網(wǎng) ）

篇3

【中圖分類號(hào)】R19 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1004-7484（2014）02-0730-01

研究頸肩腰腿痛預(yù)防保健治療十余年，感覺就做了八個(gè)字“易筋歸一?道法自然”，其中易筋是手段；歸一是目的；道法自然是方法。現(xiàn)試著闡述一下易筋歸一道法自然的理念，供同道參考，僅代表個(gè)人觀點(diǎn)，有不對(duì)之處，請(qǐng)同道指正。

1 易筋歸一道法自然的基本概念

1.1 易筋歸一概念

1.1.1 易 ①變化、變通、改換、脫換之意；②指《易經(jīng)》三大原則即變易，簡易，不易。

1.1.2 筋 廣義指全身各臟腑系統(tǒng)；狹義指筋骨、筋膜、經(jīng)絡(luò)、經(jīng)筋等。

1.1.3 歸 廣義指維持現(xiàn)狀或趨于好轉(zhuǎn)，對(duì)不同個(gè)體需求不同或程度不同；狹義指返回、回到、恢復(fù)到”一”的狀態(tài)。

1.1.4 一 廣義指原始的、自然的健康狀態(tài)或均衡狀態(tài)；狹義指脊柱前后看是“一”或左右看是“S曲線”。

1.1.5 易筋 就是改變筋骨筋膜的位置、功能和狀態(tài)，其方法少到無內(nèi)，多到無窮。

1.1.6 歸一 指恢復(fù)筋骨筋膜的原始的自然的健康狀態(tài)或均衡狀態(tài)，追求完美的歸一是很難的，而要維持動(dòng)態(tài)的均衡狀態(tài)：緩解疼痛，改善功能，提高生活質(zhì)量，防止進(jìn)行性加重。

1.1.7 易筋歸一 就是改變筋骨筋膜的位置恢復(fù)其原始的自然的健康狀態(tài)或均衡狀態(tài)。

1.1.8 易筋歸一療法 改變筋骨筋膜的位置使其恢復(fù)原始的自然的健康狀態(tài)或均衡狀態(tài)的治療方法。

1.2 道法自然概念

1.2.1 道 ①路，方向，途徑；②法則，規(guī)律；③學(xué)術(shù)或宗教的思想體系；④方法，辦法，技術(shù)；⑤傳道，取道、引導(dǎo)，疏導(dǎo)；⑥《易經(jīng)》一陰一陽謂之道。

1.2.2 法 ①處理事物的手段；②標(biāo)準(zhǔn)、模式、規(guī)范，可仿效的；③效法，遵循。

1.2.3 自然 ①天然的，原始的，均衡的，非人為的；②不做作，不拘束，不呆板，不勉強(qiáng)的；③人或事物的自由發(fā)展變化，不受外界干預(yù)。

1.2.4 道法自然 出自《道德經(jīng)》“人法地，地法天，天法道，道法自然”，其讀法“道?法?自然”，而非“道法?自然”，其中法字為動(dòng)詞，意為效法，遵循，道法自然的意思就是大道以自然為綱，遵循其法則。在這里我們理解為治療方法的選擇上遵循綠色的、天然的、均衡的、非藥物的、非創(chuàng)或微創(chuàng)的法則。

1.3 易筋歸一道法自然療法 選擇一切綠色的、天然的、均衡的、非藥物的、非創(chuàng)或微創(chuàng)法的治療方法來改變筋骨筋膜的位置使其恢復(fù)原始的自然的健康狀態(tài)或均衡狀態(tài)的方法。

2 易筋歸一道法自然的理論基礎(chǔ)

2.1 理論觀點(diǎn) 源于《易經(jīng)》均衡理論和《宣蟄人軟組織外科學(xué)》對(duì)應(yīng)補(bǔ)償及系列補(bǔ)償調(diào)節(jié)機(jī)制。

2.1.1 均衡理論 均衡是最好的狀態(tài)，但是很少，就是我們自己的身心來說也是如此。均衡是動(dòng)態(tài)的，沒有靜態(tài)的。易筋歸一中我們強(qiáng)調(diào)結(jié)構(gòu)、功能、情志歸一，其實(shí)就是強(qiáng)調(diào)結(jié)構(gòu)、功能、情志在一定范圍內(nèi)達(dá)到均衡，這就需要一個(gè)過程。均衡也有兩種狀態(tài)，一是正常情況下的均衡，另一種是異常情況下的均衡，醫(yī)生的角色就是怎樣去鑒別這兩種均衡并調(diào)理之。易筋歸一的目的在于歸一，但不是盲目的歸一，不能脫離了均衡原則。

2.1.2 調(diào)節(jié)機(jī)制 某種原因引發(fā)局部疼痛（即原發(fā)性疼痛），疼痛引起肌痙攣，肌痙攣破壞了身體的動(dòng)力性平衡，一組肌肉的痙攣必將引起對(duì)應(yīng)肌肉發(fā)生與其相適應(yīng)的變化，以達(dá)到補(bǔ)償原發(fā)部位肌痙攣引起的功能障礙和功能失調(diào)，即對(duì)應(yīng)補(bǔ)償調(diào)節(jié)。如果原發(fā)部位的肌痙攣經(jīng)過對(duì)應(yīng)補(bǔ)償調(diào)節(jié)，仍不能保持其正常功能和平衡，則又將引起其上方和下方的一系列肌肉進(jìn)行補(bǔ)償而再調(diào)節(jié)，即系列補(bǔ)償調(diào)節(jié)[1]。

2.2 學(xué)術(shù)觀點(diǎn)及應(yīng)用

2.2.1 學(xué)術(shù)觀點(diǎn)

⑴骨正筋柔?氣血以流；⑵通則不痛?榮則不痛?正則不痛?順則不痛?松則不痛?動(dòng)則不痛[2]；⑶筋長一寸?壽延十年；⑷經(jīng)絡(luò)暢通?實(shí)為大補(bǔ)；⑸無痛一身輕?筋柔百病消；⑹生病起于過用[3]；⑺骨錯(cuò)縫?筋出槽；⑻骨錯(cuò)筋硬?全身是病；⑼少林易筋經(jīng)?少林洗髓經(jīng)；⑽無他?唯手熟爾（熟能生巧?功到自然成）；⑾專心致志?持之以恒。

2.2.2 觀點(diǎn)應(yīng)用 ⑴⑵⑶⑷⑸強(qiáng)調(diào)健康狀態(tài)或均衡狀態(tài)；⑹⑺⑻強(qiáng)調(diào)病因、發(fā)病過程及病理狀態(tài)；⑼強(qiáng)調(diào)正確保健養(yǎng)生方法，⑵也是在強(qiáng)調(diào)方法，即使之通、使之榮、使之正、使之順、使之松、使之動(dòng)[2]；⑽⑾強(qiáng)調(diào)長期堅(jiān)持⑵⑼正確保健養(yǎng)生方法就能從⑹⑺⑻病理狀態(tài)恢復(fù)到①②③④⑤健康狀態(tài)或均衡狀態(tài)。

3易筋歸一道法自然的相互關(guān)系

3.1 易筋歸一 易筋與歸一是一對(duì)哲學(xué)概念，其中易筋為手段，易筋主動(dòng)主外主調(diào)節(jié)，強(qiáng)調(diào)技法動(dòng)作，亦稱易筋技法；歸一為目的，主靜主內(nèi)主均衡，強(qiáng)調(diào)功法悟道，亦稱歸一功法；易筋到一定程度自然就進(jìn)入歸一狀態(tài)；易筋能堅(jiān)其外，歸一能清其內(nèi)；易筋的方法少到無內(nèi)，多到無窮，但主要有兩類，一是主動(dòng)易筋，即主動(dòng)的、充分的、盡力的伸筋拔骨來調(diào)節(jié)均衡，二是被動(dòng)易筋，即運(yùn)用現(xiàn)在常用的各種治療方法及產(chǎn)品來調(diào)節(jié)均衡，而歸一的目的只有一個(gè)就是原始的自然的健康狀態(tài)或均衡狀態(tài)，要求達(dá)到身心和諧統(tǒng)一。“易筋歸一”強(qiáng)調(diào)身心并調(diào)，主要有三方面內(nèi)容：一是結(jié)構(gòu)歸一，強(qiáng)調(diào)調(diào)理筋骨，以頸肩腰腿痛為主；二是功能歸一，強(qiáng)調(diào)調(diào)理臟腑，以脊椎相關(guān)性疾病為主；三是情志歸一，強(qiáng)調(diào)調(diào)理情志，以心理情感性疾病為主。

3.2 道法自然 道法自然是樸素方法論，遵循取之于自然，用之于自然法則，強(qiáng)調(diào)綠色的、天然的、均衡的、非藥物的、非創(chuàng)或微創(chuàng)預(yù)防保健康復(fù)治療方法或方案。

3.3 易筋歸一與道法自然 易筋歸一是理念，是預(yù)防保健養(yǎng)生的理論基礎(chǔ)，強(qiáng)調(diào)結(jié)構(gòu)、功能、情志的均衡；道法自然是實(shí)現(xiàn)易筋歸一理念所采用的具體方法，遵循取之于自然，用之于自然的法則。

4 討論

現(xiàn)在社會(huì)關(guān)注最多的就是健康，從電視臺(tái)的健康講座到一般的平面媒體報(bào)道，其實(shí)就是灌輸“今天不養(yǎng)生?明天養(yǎng)醫(yī)生；今天不保健?明天養(yǎng)醫(yī)院”的健康價(jià)值觀。歸根結(jié)底就是呼吁大家要注重大預(yù)防、大保健、大養(yǎng)生、大康復(fù)的觀念。從事預(yù)防保健養(yǎng)生十多年，回過頭去看其實(shí)大家的目的都很簡單，就是要求健康，只是程度上有些區(qū)別，不管你有錢沒錢，有病的人都想健康，無病的人都想長壽；但是大家采用的手段是五花八門，但結(jié)果卻有歸一性。

易筋歸一道法自然預(yù)防養(yǎng)生保健理念是我十多年發(fā)展中醫(yī)特色療法的工作總結(jié)，是在《易經(jīng)》均衡理論、《宣蟄人軟組織外科學(xué)》對(duì)應(yīng)補(bǔ)償調(diào)節(jié)及系列補(bǔ)償調(diào)節(jié)機(jī)制和中醫(yī)治未病理論的指導(dǎo)下，結(jié)合中醫(yī)常用實(shí)用技術(shù)，創(chuàng)新的一種全新的預(yù)防保健養(yǎng)生理念、產(chǎn)品及療法，該理念強(qiáng)調(diào)回歸自然的均衡預(yù)防養(yǎng)生保健模式，能緩解現(xiàn)代社會(huì)“看病難看病貴”社會(huì)難題，其理念具有推廣普及價(jià)值。理解了易筋歸一道法自然預(yù)防養(yǎng)生保健理念，用之于人事，便無往不適了。

參考資料：

[1] 宣蟄人.宣蟄人軟組織外科學(xué)，上海文匯出版社.2004.

篇4

關(guān)鍵詞：SD大鼠 乳鼠 心肌細(xì)胞 原代培養(yǎng)

Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.07.023

【中圖分類號(hào)】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1671-8801（2013）07-0025-02

體外培養(yǎng)的大鼠心肌細(xì)胞保留了基本結(jié)構(gòu)和功能，不受體內(nèi)神經(jīng)、體液等的影響，被廣泛用于心血管生物學(xué)、細(xì)胞電生理、藥理毒理學(xué)等研究，足夠純度和活力的心肌細(xì)胞是保證完成這些實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)[1]。文獻(xiàn)報(bào)道的心肌細(xì)胞培養(yǎng)的方法很多，但都較為復(fù)雜，導(dǎo)致培養(yǎng)得到的心肌細(xì)胞純度、活力各不相同[2]。本研究結(jié)合前人的經(jīng)驗(yàn)，對(duì)新生SD大鼠的心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)方法進(jìn)行了簡化，以期培養(yǎng)出純度較高、活力較強(qiáng)的大鼠心肌細(xì)胞。

1 材料和方法

1.1 材料。

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。出生1～3d的SD大鼠，雌雄不拘，由南昌大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供。

1.1.2 材料與試劑。DMEM/F12干粉培養(yǎng)基（DF培養(yǎng)基）、小牛血清、D-Hank’s液，5-溴脫氧尿嘧啶（Brdu）、I型膠原酶購自Sigma公司；小鼠抗大鼠α-橫紋肌肌動(dòng)蛋白單克隆抗體（α-SA），山羊抗小鼠IgG購于武漢博士德微生物工程有限公司。其余試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.1.3 儀器。超凈工作臺(tái)（蘇州凈化設(shè)備有限公司），恒溫二氧化碳培養(yǎng)箱（Thermo，德國），倒置相差顯微鏡（Olympus公司，日本），2-16PK高速冷凍離心機(jī)（Sigma公司，德國），玻璃培養(yǎng)瓶、24孔培養(yǎng)板、200目網(wǎng)篩（上海博光生物科技有限公司）。

1.2 方法。

1.2.1 溶液配制。將DF培養(yǎng)基溶解于三蒸水中，加壓過濾除菌，調(diào)整至pH7.2～7.4，于-20℃保存，臨用前加入100ml/L小牛血清，即為DF培養(yǎng)液，用于細(xì)胞培養(yǎng)。將I型膠原酶和胰蛋白酶溶解于無血清的DF培養(yǎng)溶液中，配成含0.8g/L I型膠原酶和0.05%胰蛋白酶的溶液用于消化心肌組織。

1.2.2 心臟組織的獲取、消化及培養(yǎng)。

（1）取出生1～3d的SD大鼠，75%酒精消毒皮膚后開胸，用眼科彎鑷取心臟心尖部，置于預(yù)冷的D-Hank’s液中，剪除結(jié)締組織，漂洗3次。

（2）取心尖部分的心室組織，用眼科剪剪成約大小約1mm3的小塊，加入1mlDF培養(yǎng)液，用吸管吹打成組織懸液，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶，用混合酶溶液消化，磁力37°C保溫?cái)嚢瑁?0～60r/min）消化8min，棄去上清液。

（3）剩余組織塊加混合酶溶液（每g心肌組織約需10ml）消化8min×5次，合并上清液，加DF培養(yǎng)液終止消化，過200目網(wǎng)篩，以1000r/min離心5min，收集沉淀，以DF培養(yǎng)液漂洗2次，置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2h。

（4）采用差速貼壁分離技術(shù)，將2h后尚未貼壁的心肌細(xì)胞懸液在無菌條件下用吸管吸出，調(diào)整細(xì)胞濃度為5.0×105個(gè)/ml，將單細(xì)胞懸液接種于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)器板中，首次24h后換液，之后隔日換液。

1.2.3 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察和存活率測定。取等量0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液與細(xì)胞懸液滴于細(xì)胞計(jì)數(shù)板上，死亡細(xì)胞藍(lán)染，任選10個(gè)高倍視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)4個(gè)大格中細(xì)胞總數(shù)及陽性細(xì)胞數(shù)，存活率=活細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù)×100%，計(jì)數(shù)3次取平均。分別于培養(yǎng)的5、7、15、20、30d，計(jì)算細(xì)胞的存活率，并在倒置相差顯微鏡下觀察心肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。

1.2.4 細(xì)胞純度鑒定。取培養(yǎng)72h的心肌細(xì)胞，采用以α-SA抗體為一抗、山羊抗小鼠IgG為二抗的免疫組織化學(xué)染色進(jìn)行純度鑒定，心肌細(xì)胞細(xì)胞核藍(lán)染，胞質(zhì)呈褐色，成纖維細(xì)胞因不含肌動(dòng)蛋白而胞質(zhì)不著色。鏡下任選10個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)4個(gè)大格中褐色胞質(zhì)的細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的比例（重復(fù)6次），確定心肌細(xì)胞的純度。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法。實(shí)驗(yàn)中的數(shù)據(jù)采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，所有數(shù)據(jù)均以X±S表示，多個(gè)樣本均數(shù)間比較采用q檢驗(yàn)，兩組之間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 心肌細(xì)胞的純度鑒定。培養(yǎng)72h后，以免疫熒光法檢測，測定6次得到心肌細(xì)胞平均純度為（98.2±0.8）%。

2.2 心肌細(xì)胞存活率的計(jì)算。不同培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)間的存活率均數(shù)之間兩兩比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。第30d的存活率與第3d比較顯著降低，P

表1 原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞存活率

注：細(xì)胞總數(shù)為10000個(gè)，*與第5d比較，P

2.3 心肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察。采用倒置相差顯微鏡觀察，剛接種時(shí)細(xì)胞成圓形顆粒，折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。培養(yǎng)2～4h后細(xì)胞開始貼壁，慢慢變?yōu)樗笮危?2h左右伸出偽足，呈菱形、星形等形態(tài)，偶見細(xì)胞搏動(dòng)。培養(yǎng)24h左右時(shí)，細(xì)胞貼壁完全呈梭形，有偽足，并在細(xì)胞間形成交聯(lián)（圖1A，B），可見自發(fā)性搏動(dòng)，各個(gè)細(xì)胞頻率、節(jié)律不同。48h后，逐漸形成細(xì)胞簇，細(xì)胞搏動(dòng)較多（搏動(dòng)頻率5～90次/min不等），在細(xì)胞密度較大的部位可見多個(gè)細(xì)胞以同一頻率搏動(dòng)（圖1C）。培養(yǎng)72h左右時(shí)，細(xì)胞交織成網(wǎng)，形成細(xì)胞單層或細(xì)胞簇，呈放射狀，形態(tài)不規(guī)則，搏動(dòng)同步，搏動(dòng)的頻率在（70～90）次/min，同一批細(xì)胞搏動(dòng)頻率一致（圖1D）。3～20d內(nèi)心肌細(xì)胞形態(tài)活力正常，20d后搏動(dòng)率開始減少，30d后部分細(xì)胞停止搏動(dòng)，細(xì)胞皺縮、脫落。

3 討論

離體心肌細(xì)胞對(duì)于心血管生理、藥理、代謝、分子生物學(xué)等方面的研究具有重要作用，然而心肌細(xì)胞增殖能力低，只有剛出生不久的乳鼠心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)可得到大量高純心肌細(xì)胞[3]。心肌細(xì)胞的分離主要有組織貼塊法和酶消化法，酶消化法獲得的細(xì)胞純度較高，便于生物學(xué)觀測和實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用更加廣泛，但是對(duì)心肌細(xì)胞損傷大，導(dǎo)致獲得的細(xì)胞活力不高[4]。

本研究對(duì)如何提高心肌細(xì)胞純度、減少消化損傷進(jìn)行了多次探索，總結(jié)經(jīng)驗(yàn)如下：

（1）差速貼壁分離聯(lián)合Brdu抑制法去除非心肌細(xì)胞。差速貼壁法操作簡便、用時(shí)短、對(duì)細(xì)胞影響小，但不適于長期培養(yǎng)。加入Brdu培養(yǎng)48h可抑制成纖維細(xì)胞，對(duì)心肌細(xì)胞無毒性與抑制作用，可用于培養(yǎng)時(shí)間較長的實(shí)驗(yàn)。

（2）使用小牛血清而不用胎牛血清。血清的成分可影響細(xì)胞的存活時(shí)間和生長狀態(tài)，胎牛血清含有大量有絲分裂因子，Brdu難以抑制成纖維細(xì)胞的生長，培養(yǎng)效果不如小牛血清。

（3）采用低濃度胰酶與I型膠原酶消化心肌細(xì)胞。文獻(xiàn)中胰酶用量0.05%～0.25%不等，本研究發(fā)現(xiàn)高濃度胰酶會(huì)損傷心肌細(xì)胞間質(zhì)，細(xì)胞死亡率增加，胰酶濃度過低，細(xì)胞聚集成團(tuán)，得不到單個(gè)細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)采用0.8g/L I型膠原酶和0.05%胰蛋白酶消化心肌細(xì)胞，對(duì)心肌細(xì)胞損害小，且消化效率高。

（4）消化時(shí)間與次數(shù)。采取短時(shí)多次的方式加入消化酶，每次不超過8min，以減少對(duì)心肌細(xì)胞的損傷。

（5）30d后存活率明顯降低。心肌細(xì)胞需在工作條件下才能保持活力，無負(fù)荷狀態(tài)長期培養(yǎng)，會(huì)導(dǎo)致肌絲、線粒體減少，細(xì)胞萎縮[5]，因此培養(yǎng)的心肌細(xì)胞應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)使用。

總之，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用改良并簡化的心肌細(xì)胞培養(yǎng)方法可得到純度和存活率較高的原代乳鼠心肌細(xì)胞，操作方便，重復(fù)性好，適合進(jìn)一步推廣。

參考文獻(xiàn)

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篇5

【關(guān)鍵詞】 海水浴療法；療養(yǎng)院；保健養(yǎng)生

【Abstract】ObjectiveTo investigate the effect of the sea bath therapy in the health care and prevention and treatment of diseases. MethodsThe flotage, the pressure, the massage effect and the trace elements of the sea into the human body through skin were investigated.The effects on physiology and pathology were studied. Results The sea bath in coast sanitariums could increase the health of the recuperators. Conclusion The sea bath can increase the health and the double benefits of the sanitariums.

【Key words】 Sea bath;Sanitarium;Health care

海水是海濱療養(yǎng)地的主要療養(yǎng)因子，是一種重要的療養(yǎng)康復(fù)資源。海水浴療法是利用海水鍛煉身體和防治疾病的方法[1]。海水浴療法科學(xué)舒適，在療養(yǎng)文化中占有重要的地位。

1海水療法的由來與發(fā)展

海洋占地球表面的71%，近乎于陸地的2.5倍，盡管海陸分布極不均衡，但與人類生存息息相關(guān)，世界上許多國家在日益重視開發(fā)海洋資源的同時(shí)，積極利用海洋環(huán)境來發(fā)展療養(yǎng)事業(yè)。

在人類歷史上，水之用于醫(yī)療由來已久。公元前500年歐洲就有文獻(xiàn)記載，海水可以治療人類一切疾病。古希臘人相信海水具有清洗惡性腫瘤組織與刺激神經(jīng)的效力。羅馬帝國時(shí)期，尋常百姓便以水療法醫(yī)治疾病；當(dāng)時(shí)，奧古斯都大帝也浸泡海水來醫(yī)治熱病。16世紀(jì)，法國國王亨利三世利用海水來治療皮膚病。

自行車賽世界冠軍路易松?博貝發(fā)生車禍后，康復(fù)階段住在布列塔尼半島拉芒什海峽沿岸的羅斯科夫海水療養(yǎng)中心。這位運(yùn)動(dòng)員發(fā)現(xiàn)海水療養(yǎng)對(duì)他受損的肌體有“驚人的效果”，于是于1964年在基伯龍半島開設(shè)了一家海水療養(yǎng)院。

目前我國沿海地區(qū)，如興城、大連、秦皇島、北戴河、青島、煙臺(tái)、鼓浪嶼等地療養(yǎng)院均已實(shí)施海水浴療法，并對(duì)海水浴療法保健養(yǎng)生防治疾病不斷地進(jìn)行研究探討。戴蓉等[2]對(duì)患有Ⅱ型糖尿病(DM)的軍隊(duì)療養(yǎng)員實(shí)施海水浴療法，使用超聲心動(dòng)圖儀觀察患者海水浴前后LAD、EF、FS、E/A指標(biāo)變化，使用常規(guī)心電圖描記并觀察海水浴前后的心電圖變化，并與健康療養(yǎng)員對(duì)照，得出海水浴療法對(duì)DM患者心臟康復(fù)有較好效果。劉秀珍等[3]對(duì)老年冠心病患者冠脈介入治療后的療養(yǎng)康復(fù)期中，海水浴療法對(duì)其左室功能的影響進(jìn)行研究，應(yīng)用超聲心動(dòng)房室平面位移法AVPD記錄二尖瓣環(huán)各位點(diǎn)均值A(chǔ)VPDmean和左房射血所致各位點(diǎn)均值(AVPDa)，改良Sinpsan法計(jì)算左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)，對(duì)療養(yǎng)前、后各數(shù)值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，得出海水浴療法能提高老年冠心病患者PTCA術(shù)后的左室功能。鄭芳等[4]應(yīng)用超聲心動(dòng)圖技術(shù)研究海水浴療法對(duì)高血壓患者左房收縮功能的康復(fù)作用，根據(jù)左室質(zhì)量指數(shù)(LVMI)高血壓患者被分為左室正常構(gòu)型和左室肥厚型，經(jīng)過超聲心動(dòng)圖技術(shù)分析被觀察者療養(yǎng)前、后的左房收縮功能各指標(biāo)，并進(jìn)行比較，得出海水浴療法是一項(xiàng)綜合性的全身有氧運(yùn)動(dòng)，能降低高血壓病患者的心肌耗氧量，減輕心臟負(fù)荷，改善左房收縮功能。大量的研究證實(shí)了海水浴療法對(duì)人體有保健養(yǎng)生防治疾病的作用。

2海水浴療法使療養(yǎng)院的社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益得到提高

隨著我國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，社會(huì)文明的進(jìn)步和人民生活水平的提高，療養(yǎng)事業(yè)越來越受到重視并獲得發(fā)展。海水療養(yǎng)不僅具有醫(yī)療的效果，也是休閑生活中的明珠項(xiàng)目，療養(yǎng)院不再屬退休老人和病人康復(fù)專用，在經(jīng)濟(jì)發(fā)展、國民收入提高、重視休閑生活的今天，從事海水療養(yǎng)的觀念越來越深入普及，現(xiàn)代療養(yǎng)院吸引著重視保健和愛好運(yùn)動(dòng)的顧客。健身與減肥游泳法得到了更多的關(guān)注和青睞，給療養(yǎng)院帶來生機(jī)和社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益。

3海水浴療法醫(yī)療保健作用的科學(xué)依據(jù)

放射性同位素研究結(jié)果表明[5]，一般情況下，機(jī)體浸入海水中，在20 min 內(nèi)，機(jī)體表面就會(huì)形成一層黏膜，使人體有“滑膩”的感覺。這層黏膜主要是由生物、化學(xué)元素組成的，附著在體表面上，形成離子層。海水中的元素離子不斷通過該層膜擴(kuò)散，滲透到皮膚表面。有的可附著于體表，通過對(duì)皮膚的刺激，發(fā)揮作用；有的元素，如氯化鈉、重碳酸鹽和鐵、銅、鋅、鈣、鎂、錳、鋇、鈷、碘、砷等通過皮膚進(jìn)入體內(nèi)，影響著人體的生理或病理活動(dòng)。

海水能影響人體的產(chǎn)熱和散熱過程，激發(fā)酶促反應(yīng)，促進(jìn)物質(zhì)代謝和能量交換，并提高人體對(duì)外界環(huán)境溫度變化的適應(yīng)能力。同時(shí)，還可改善機(jī)體的微循環(huán)及周圍血液循環(huán)、血管擴(kuò)張，從而大大增強(qiáng)心腦血管系統(tǒng)的功能。

進(jìn)行海水浴時(shí)，由于人體受到機(jī)械性的靜水壓力作用，促使靜脈血和淋巴液回流，回心血流量增多，心輸出量增大；并壓迫胸廓、腹壁，使胸內(nèi)壓增高，從而增強(qiáng)呼吸深度，促進(jìn)氣體交換和代謝，增強(qiáng)了肺的通氣功能；水流的壓力或沖擊力的作用還能刺激神經(jīng)系統(tǒng)興奮，這將對(duì)心血管、內(nèi)分泌等系統(tǒng)產(chǎn)生良好的影響。

由于受到海水的浮力作用，使得人體運(yùn)動(dòng)器官負(fù)荷變輕，肌張力降低，肌糖元和肌紅蛋白儲(chǔ)存量明顯增多，可以改善肌肉、關(guān)節(jié)、骨骼組織代謝及營養(yǎng)供給，有利于運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)疾患的功能康復(fù)。

大海廣闊，海水碧藍(lán)，海天一色的壯觀景色，對(duì)人心理能產(chǎn)生積極的心理活動(dòng)與狀態(tài)，稱為海水的心理效應(yīng)[5]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明，心理因素在疾病的發(fā)生發(fā)展中產(chǎn)生著直接或間接的影響和作用。有害的心理因素可以損害人體正常的生理功能。當(dāng)有害作用過分強(qiáng)烈可導(dǎo)致疾病發(fā)生。積極樂觀的心理因素能增強(qiáng)機(jī)體的抗病能力，提高機(jī)體的免疫力，從而有利于心身健康。獨(dú)具特色的海濱療養(yǎng)地的景觀，可使大腦皮質(zhì)出現(xiàn)一個(gè)新的、外來的刺激活動(dòng)，如氣勢(shì)磅礴的大海，周期性的濤聲，不斷地刺激大腦皮質(zhì)，產(chǎn)生興奮灶的轉(zhuǎn)移，從而消除精神緊張和心理矛盾，使心情愉快、情緒穩(wěn)定、睡眠改善。在觀賞海濱景觀時(shí)，產(chǎn)生心曠神怡之感，有益于神經(jīng)精神系統(tǒng)功能的協(xié)調(diào)平衡。

4海水浴療法在煙臺(tái)療養(yǎng)院的應(yīng)用

煙臺(tái)療養(yǎng)院處于渤、黃海連接之處，有豐富的海洋資源。自建院以來，療養(yǎng)院的醫(yī)務(wù)人員一直對(duì)自然療養(yǎng)因子進(jìn)行探討、挖掘。海水浴療法作為療養(yǎng)的重要內(nèi)容在療養(yǎng)院中實(shí)施了20多年，建立了一套完整規(guī)范的制度。煙臺(tái)適宜的海水浴時(shí)間是每年的7～10月份，進(jìn)行海水浴的療養(yǎng)員必須經(jīng)過全面體檢，經(jīng)治醫(yī)師要嚴(yán)格掌握海水浴的適應(yīng)證與禁忌證，對(duì)適合海水浴的療養(yǎng)人員發(fā)給準(zhǔn)浴證。浴前在體療醫(yī)師的指導(dǎo)下進(jìn)行充分的肢體活動(dòng)，浴中有海上救護(hù)隊(duì)巡邏，有醫(yī)務(wù)人員跟隊(duì)保健，浴后要用淡水沖洗身體。每次20～60 min，以不感覺疲勞為宜。實(shí)踐證明，應(yīng)用海水療法的療養(yǎng)員，療養(yǎng)期結(jié)束時(shí)的健康狀況經(jīng)心電圖、化驗(yàn)等輔助檢查有明顯改善，且自我感覺良好，對(duì)促進(jìn)健康效果明顯，得到了廣大療養(yǎng)員的喜愛。

總之，海水浴療法對(duì)促進(jìn)身體健康、治療疾病、提高社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益有著重要的作用。

參考文獻(xiàn)

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